新・アラビア半島定点観測 前田高行責任編集

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Adeno Associated vecteur viral construction et ProductionAAV VEGF, AAV ANG1, et AAV LacZ plasmides ont 茅t茅 construits comme d茅crit pr茅c茅demment (Su et al, 2000, 2009). VEGF165 humain et l'ADNc de ANG1 humain ont 茅t茅 clon茅s dans ces vecteurs. promoteur du CMV a 茅t茅 utilis茅 pour contr么ler l'expression des g猫nes dans l'ensemble de ces vecteurs. Vecteurs AAV ont 茅t茅 produites en utilisant un syst猫me de co-transfection 脿 trois plasmides (Matsushita et al, 1998). Deux plasmides auxiliaires, l'une avec ad茅noviral VA, E2A, et les r茅gions E4 et l'autre avec la rep de l'AAV et AAV de s茅rotype une g猫nes cap (fourni par Xiao Xiao, Universit茅 de Caroline du Nord), ont 茅t茅 co-transfect茅es avec le plasmide AAV dans des cellules HEK293 pour conditionner le vecteur AAV. Vecteurs AAV ont 茅t茅 purifi茅s en utilisant CsCl2 centrifugation. Les titres viraux ont 茅t茅 d茅termin茅s par analyse dot-blot de la teneur en ADN et exprim茅es en g茅nome viral (vg).